Componentes en HPLC: Columna C18.

 Columna C18 para HPLC.

¿Qué es?

    También conocida como columna C18 de fase reversa o columna “ODS” (octadecilsilano), la columna C18 es un sistema que permite la separación de sustancias. Este es el tipo de columna más utilizado en HPLC de fase reversa. Es un componente crucial en HPLC, ya que a través de la misma, fluye la muestra que queremos analizar, la fase móvil y el buffer. Brinda el soporte estructural para la sílica, sobre la cual está adherida la fase estacionaria que interactúa con el analito. 

¿Cómo es su estructura general?

    La columna de forma tubular, alberga en su interior a la sílica, cuyas partículas tienen un tamaño de micras; y a la fase estacionaria: octadecilsilano, enlazado a la superficie de la sílica. A su vez, esta matriz dispone de poros por los que fluye la fase móvil y nuestra muestra. Estos poros tienen  un tamaño medido en Å. 

¿Cómo es su estructura molecular?

    Esta fase se denomina estacionaria porque permanece fija en su soporte. Está compuesta por moléculas de 18 átomos de carbono (C18), largas cadenas de hidrocarburo, apolares o hidrofóbicas.

Esquema de ODS enlazado a una partícula de sílica.

¿Cómo funciona?

    Las moléculas de ODS conforman el “sitio activo” e interactúan con los analitos, atrayéndolos con mayor o menor afinidad según su polaridad. Esta propiedad explica por qué las moléculas apolares son retenidas más tiempo dentro de la columna, ya que tienen una mayor afinidad por las moléculas de ODS. Por el contrario, las moléculas más polares eluyen a lo largo de la columna con mayor libertad, y presentan un menor tiempo de retención. Los analitos no polares eluyen más tarde.  Así, la polaridad de los analitos, influye en su separación en mezclas complejas. 

¿Cuáles son sus usos más comunes?

    Las columnas C18 se emplean en HPLC de fase reversa para análisis de muestras en diversas industrias, como la farmacéutica, ambiental, bioquímica, entre otras.

Ahora me gustaría saber ¿Qué muestras te han resultado más interesantes de estudiar empleando estas columnas? ¿Qué tipos de columna de fase reversa has empleado en tus análisis de laboratorio? Te invito a compartir tus experiencias.

Bibliografía:

https://www.chromatographyonline.com/view/anatomy-lc-column-beginning-modern-day-0

https://www.pharmaguideline.com/2018/05/c18-hplc-columns-and-their-properties.html

https://uhplcs.com/guide-of-c18-reverse-phase-column/

https://lab-training.com/reverse-phase-chromatography/

https://www.sepscience.com/reverse-phase-vs-normal-phase-hplc-how-to-choose-the-right-tool-11950

Declaración de autoría: la redacción de este trabajo se realizó integramente sin asistencia de IA.